Анализы на ВПЧ. Что это такое и как его берут

Врач отправляет пациента сдавать анализ на ВПЧ в разных ситуациях: и когда человек совершенно здоров (в рамках скрининга), и когда присутствуют определенные болезненные симптомы. Поэтому каждому стоит знать, что это за анализ, как и зачем его берут, какие результаты могут быть получены.

Зачем сдавать анализы на папилломавирус

Вирусом папилломы человека на земле инфицированы миллиарды людей, потому что распространен он чрезвычайно широко. Однако далеко не у всех в течение жизни проявляются какие-либо клинические симптомы. Чаще всего иммунная система человека справляется с заражением, и носитель вируса даже не узнает о том, что был в опасности.

В последние десятилетия, после множества проведенных исследований, ученые пришли к выводу, что некоторые типы штаммы ВПЧ обладают онкогенностью, то есть повышают риск злокачественного перерождения клеток.

Эти штаммы передаются преимущественно половым путем (хотя возможен бытовой или вертикальный – от матери к ребенку). Вирус поражает эпителий интимных органов, а результат его разрушительной работы обычно обнаруживает врач-гинеколог, уролог, дерматовенеролог, онколог.

ВПЧ приводит к формированию остроконечных и плоских кондилом у мужчин и женщин, а также других, некондиломатозных поражений (например, бовеноидного папулеза). Женщинам гинеколог часто ставит диагноз «интраэпителиальная неоплазия шейки матки». Вторая и третья степень этого заболевания считается предраковым состоянием и требует очень внимательного отношения.

Важно!

 Злокачественных опухоли развиваются только через много лет постоянного носительства вируса. Обычно он исчезает из организма самостоятельно или после проведенного лечения. Анализ на вирус папилломы человека сам по себе не дает основания ставить какой-либо диагноз. Он просто фиксирует факт заражения.

Опасными в плане развития рака сегодня считаются штаммы под номерами HPV 70, 68, 64, 59, 50, 39, 33, 31, 18, 16. Их называют вирусами высокого онкогенного риска (ВКР). Данные штаммы провоцируют опухоли шейки матки, вульвы, влагалища  у женщин и полового члена у мужчин.

В последние годы публикуется информация (например, в журнале Journal of Clinical Oncology и других медицинских изданиях) о связи ВПЧ с раком полости рта, горла, ануса, прямой кишки, что связывают с распространением орального и анального секса, в том числе среди однополых партнеров.

Пик заражения ВПЧ всегда приходится на начало активной половой жизни, а вот риск развития рака повышается с возрастом и накопленными болезнями. Чем старше человек, и чем дольше он инфицирован онкогенным штаммом, тем выше опасность.

Виды анализов на папилломавирус

Карцинома шейки матки – самое распространенное заболевание, связанное с инфицированием папилломавирусом, от него до сих пор ежегодно умирает несколько сотен человек. Поэтому все женщины должны ежегодно проходить гинекологический осмотр с цитологическим мазком, а после 30 лет – сдавать анализ на ВПЧ. Бесплатно по полису ОМС такой анализ не делают. В поликлинике по месту жительства можно выполнить только цитологический мазок.

Мужчины сталкиваются с анализами, если инфицирована их партнерша (партнер), поскольку лечение надо проходить одновременно, или у них самих обнаружены поражения, связанные с ВПЧ – кондиломы, болезнь Боуэна, бовеноидный папулез.

Сегодня для выявления ВПЧ в организме применяется два метода молекулярной биологии:

• полимеразно-цепная реакция;
• метод гибридного захвата (digene-test).

Существуют и другие методы, но они используются редко и не стандартизированы.

И ПЦР, и дайджин-тест достаточно информативны и точны. Между ними есть сходства – оба основаны на выявлении ДНК вируса в клетках эпителия человека, биоматериал для анализа берется одинаково. Различия состоят в способах обработки материала и получения результата.

Что такое полимеразно-цепная реакция

Прогрессивная методика, разработка которой продвинула вперед многие области науки, в том числе медицины. Метод основан на многократном умножении отдельных фрагментов ДНК в полученном клеточном материале.

Для выполнения анализа на папилломавирус используется специальный прибор-аплификатор. В нем молекула ДНК нагревается до 80-90 градусов и разделяется на две нити – РНК. К ней добавляют вещества-праймеры, и полученная смесь охлаждается. После этого в смесь добавляется фермент ДНК-полимераза и нуклеотиды. Смесь снова нагревается до температуры 37 градусов, при которой будет происходить нужная реакция.

Если искомая последовательность присутствует в материале (совпадает с добавленным праймером), то нуклеотиды присоединяются к концам праймеров, и участок ДНК удваивается путем естественной репликации. Затем процесс повторяется многократно, до накопления требуемого количества фрагментов, которые удается распознать.

Таким образом можно выявить даже единичный вирус или бактерию в организме, поэтому метод очень точный. Однако стоимость его высока, поскольку полученный материал нужно много раз нагреть и охладить за короткий промежуток времени. Температура в аппарате при этом контролируется до 0,1 градуса.

Виды ПЦР анализа на ВПЧ

Объем исследования может быть разным, а зависимости от того, какой нужен результат. Обычно тот или иной тип анализа рекомендует лечащий врач, потому что именно он оценивает полученные результаты, одновременно учитывая клинические проявления и индивидуальный анамнез пациента.

Общий анализ ПЦР

Анализ может быть упрощенным. Он называется ВПЧ скрининг. В этом случае исследуется ДНК одного или сразу определенной группы штаммов, имеющих высокую онкогенность. Отдельные штаммы при этом не выделяются.

Что это значит? При таком анализе будет только положительный или отрицательный результат. В бланке указывается, какие штаммы исследуются. Например, популярен анализ на выявление 14 штаммов ВПЧ с номерами 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, а также скрининг только на два самых опасных – 16 и 18.

Результат «обнаружено» в этом анализе расшифровывается как инфицирование одним из вирусов данной группы или несколькими из них, но какими именно, исследование не покажет.

Таким образом, скрининг только фиксирует заражение или его отсутствие на данный момент. Он не может показать количество вируса в организме и не может быть основанием для назначения лечения.

Присутствие ДНК ВПЧ не означает, что человек болен – это лишь повод для более тщательного наблюдения в дальнейшем и повторной сдачи анализов через год – два. Возможно, через этот срок вирус покинет организм.

Кроме единой строчки с перечислением номеров ВПЧ, в таблице на бланке такого анализа будет лишь еще одна строка – КВМ. Эта аббревиатура расшифровывается как «контроль взятия материала». Данный показатель нужен для того, чтобы видеть, правильно ли проведена процедура забора биоматериала, достаточно ли в нем клеток эпителия, чтобы выполнить корректную амплификацию.

Норма КВМ – lg>4. Если этот показатель меньше, значит, материал был взят неправильно. В полученном образце слишком мало клеток, и среди них может не оказаться пораженных вирусом. Тогда будет получен ложноотрицательный результат.

Дифференцированный анализ ПЦР

В данном анализе используется генотипирование – определение специфической последовательности ДНК каждого из исследуемых штаммов в отдельности. Соответственно, на бланке ответа будет несколько строчек, например: ВПЧ 16 – не обнаружено; ВПЧ 18 – обнаружено. Так можно определить, какой конкретно штамм присутствует в организме. Также выполняется оценка КВМ.

Это тоже скрининговый метод, только расширенный, более подробный. Он фиксирует лишь факт заражения, но не определяет, стал ли конкретный вид ВПЧ провокатором заболевания. Однако вместе с цитологическим мазком, такой ПЦР-анализ повышает эффективность выявления ассоциированных с ВПЧ заболеваний половых органов.

Количественный анализ ПЦР

Количественный анализ диагностически более значим, чем качественный, ведь он определяет вирусную нагрузку на организм. Обычно назначается при положительных результатах качественного теста.

Концентрация вируса в тканях отражает тяжесть течения инфекции, позволяет врачу составить прогноз ее течения с учетом клинических симптомов или отследить результативность проведенного лечения.

В количественном анализе подсчитывается число копий вируса, приходящихся на число клеток эпителия. Таблица с результатами включает дополнительный столбец, который отражает количество геном-эквивалентов на 10*5 клеток.

Расшифровка его проста: если показатель менее 1000, то есть меньше 10*3 на 10*5 клеток, то он клинически незначим и не рассматривается как признак заболевания. Это значит, что вирус для организма неопасен и, скорее всего, иммунная система успешно подавит его.

Показатель между 10*3 и 10*5 (то есть от 10000 до 100000 геном-эквивалентов) – это расценивается, как клинически значимая концентрация, которая уже может вызывать клинические признаки.

Данные выше 10*5 геном-эквивалентов на 10*5 клеток считаются повышенной клинической нагрузкой при персистировании инфекции в организме более года. Такой результат у женщины дает основания для беспокойства. Скорее всего, врач назначит кольпоскопию с биопсией, чтобы выяснить, в каком состоянии находится эпителий шейки матки.

При лечении заболеваний, ассоциированных с ВПЧ, имеет значение отслеживание вирусной нагрузки в динамике. Если за год количество ДНК ВПЧ снизилось на порядок, значит, инфекция подавлена. Если же вирусная нагрузка в контрольных анализах через 3, 6 9, 12 месяцев после лечения на порядок увеличилась – это признак рецидива инфекции.

Важно!

Результаты количественного или качественного анализа обычно готовы уже на следующий день после сдачи.

Самый информативный анализ – дифференцированный c генотипированием + количественный (метод Real time). Он позволяет выявить конкретные штаммы, присутствующие в клинически значимой концентрации. Этот анализ и самый дорогой. Его цена примерно в два раза выше, чем у качественного анализа на такое же количество штаммов (в среднем 2200 против 1200 не считая стоимости забора материала).

Digene-тест

Это новая молекулярная методика, позволяющая выявлять ДНК ВПЧ низкого и высокого онкогенного риска. Дайджин-тест более простой в выполнении, чем ПЦР-анализ, и вместе с этим отличается высочайшей надежностью. Поэтому многие развитые страны включают в скрининговое исследование именно его.

Тест может быть комплексным – для группы низкого и повышенного риска, или проводиться отдельно для каждой группы. Оценивается только присутствие вирусов в клинически значимой концентрации, то есть одновременно оценивается и вирусная нагрузка.

В группе высокоонкогенных вирусов проверяется наличие 13 типов: 16, 18, 31, 33, 39, 35, 45, 51, 52, 56, 59, 58, 68 штаммов. В группе вирусов с низким риском – 6, 11, 42, 44, 43.

Полученные результаты не дифференцируются по штаммам. То есть будет получен лишь ответ, обнаружено ли заражение группой штаммов с высоким/низким риском, или нет. Ошибки при нахождении штамма практически исключены.

Концентрация обозначается в других единицах, нежели в анализе ПЦР – не в геном-эквивалентах, а в относительных единицах (они отражают отношение количества копий вируса к значению, которое считается пороговым). Положительным считается результат, превышающий 1 относительную единицу.

Важно!

 В отличие от ПЦР-анализа, ответы Digene-теста клиники готовят в течение 10 дней.

Если получен результат ниже количественно значимого порога, будет выдан ответ «не обнаружено». Поэтому результаты дайджен-теста и качественного ПЦР-анализа, в котором даже минимальное количество вируса считается положительным результатом, могут быть противоположными.

Врачи рекомендуют проходить digene-тест, поскольку при прочих равных он выгоднее в финансовом плане – после получения результатов не придется отдельно проводить количественный анализ.

Подготовка к анализам

Как уже говорилось, и в ПЦР-анализе, и в дайджин-тесте используется генетический материал. Для его получения необходимо выполнить забор клеток эпителия из урогенитального тракта. Обычно у женщин берут соскоб из цервикального канала, у мужчин – из уретры. Иногда используется материал из прямой кишки, полости рта – при наличии там новообразований.

В отличие от многих других ПЦР-анализов, при исследовании ВПЧ не используют кровь, поскольку вирус в ней практически не обнаруживается.

Рекомендации для женщин:

• Чтобы получить достоверные результаты, женщине рекомендуют сдавать анализ не раньше чем через 5 дней после начала менструального цикла и не позже чем за пять дней до его окончания. Первым днем цикла считается первый день менструации. Оптимальное время сдачи анализа – первая половина цикла;
• За сутки до проведения исследования и в тот же день исключаются интимные контакты, спринцевания, использование интравагинальных лекарственных и контрацептивных средств;
• УЗИ органов малого таза с использованием интравагинального датчика, кольпоскопию и соскоб разносят во времени на 3-4 дня.

Рекомендации для мужчин:

• не мочиться за 2-3 часа до соскоба из уретры;
• отказаться от интимных контактов за 2 суток;
• общие рекомендации:
• закончить прием антибиотиков (перорально или в виде инъекций) за месяц до обследования;
• прекратить лечение с помощью местных антибактериальных или антисептических средств за 2 недели до обследования;
• в день обследования не мыть половые органы с использованием антибактериального мыла или геля.

Все это относится к плановой сдаче анализов, но если при обращении к врачу обнаружены патологические изменения, соскоб берут сразу же, без подготовки.

Процедура забора материала

У женщин клетки эпителия берут на гинекологическом кресле с помощью одноразовой цитологической щеточки, которую вводят в цервикальный канал на 1-1,5 см, несколько раз прокручивают вокруг оси, затем аккуратно вынимают так, чтобы не загрязнить материал вагинальными выделениями. Это безболезненная и быстрая процедура.

Мужчине в уретру вводят специальный зонд, всего на 3-4 см, так что болевых ощущений тоже не будет.

Затем зонд или щеточку опускают в пробирку с жидкостью, прополаскивают, отжимают о стенки, вынимают. Пробирку закупоривают и отправляют в лабораторию.

Стоимость забора материала в клиниках в среднем составляет 400 руб. Эту сумму прибавляют к сумме за само исследование.

Сроки проведения анализов

Первично анализ на ВПЧ рекомендуется сдать в следующих ситуациях:

• при плановом гинекологическом осмотре женщины старше 30 лет (если результата будет отрицательным, анализ рекомендуется сдавать каждые три года);
• при получении сомнительного цитологического мазка (ПАП-теста);
• после обнаружения на осмотре остроконечных кондилом, диспластических изменений шейки матки.
• после удаления кондилом, противовирусной терапии – через 3 месяца;
• контрольные анализы сдаются:
• при обнаружении канцерогенных штаммов ВПЧ без соответствующих клинических проявлений – через 9 месяцев с одновременным цитологическим мазком;
• после лечения выраженной неоплазии или рака шейки матки – через 3 месяца.

Если у женщины старше 30 лет анализ на онкогенный штамм ВПЧ положительный, это может означать, что инфекция персистирует, и иммунитет не может уничтожить возбудителя. До этого возраста опасность невелика – обычно повторные анализы оказываются «чистыми».

Когда наряду с положительным анализом присутствуют изменения в цитологическом мазке, это значит, что риск развития онкологической патологии высок. В этом случае рекомендуется пройти расширенную кольпоскопию с биопсией шейки матки. Одновременно назначается противовирусная терапия.

Важно!

 Повторные анализы рекомендуется сдавать в той же лаборатории, где и первичный. Так удобнее сравнивать результаты.

Перед беременностью анализ на ВПЧ необязателен. Заражение папилломавирусом не считается опасным, никак не влияет на протекание беременности и здоровье ребенка. Однако падение иммунитета в этот период нередко приводит к появлению остроконечных кондилом, если женщина инфицирована типами 6 и 11.

Контакт дыхательных путей ребенка во время родов с кондиломами может привести к формированию ювенильного папилломатоза гортани. Это редкое заболевание, поскольку формируется только на фоне сниженного иммунитета у самого ребенка, но все же ради своего спокойствия стоит сдать анализ заранее.

Сегодня разработана вакцина, защищающая от 6, 11, 16 и 18 типа ВПЧ, которой можно воспользоваться, если контакта с этими типами еще не было.

Видео в тему

Частые вопросы

Что такое анализ на ВПЧ?

Анализ на ВПЧ (вирус папилломы человека) – это лабораторное исследование, направленное на выявление наличия или отсутствия вируса в организме человека. ВПЧ является одной из самых распространенных инфекций, передающихся половым путем, и может привести к развитию рака шейки матки, генитальных бородавок и других заболеваний.

Как происходит взятие анализа на ВПЧ?

Для взятия анализа на ВПЧ обычно используется мазок с шейки матки у женщин или уретры у мужчин. Материал затем отправляется в лабораторию для проведения ПЦР-теста или других методов анализа с целью выявления наличия вируса.

Полезные советы

СОВЕТ №1

ВПЧ (вирус папилломы человека) – это группа вирусов, которые могут вызывать бородавки и различные виды рака, включая рак шейки матки. Рекомендуется регулярно проходить анализы на ВПЧ, особенно для женщин, чтобы выявить наличие вируса в ранние стадии.

СОВЕТ №2

Для анализа на ВПЧ берется мазок из шейки матки у женщин или из уретры у мужчин. Важно обратиться к врачу-гинекологу или урологу для проведения анализа и получения рекомендаций по подготовке к процедуре.