Метод ПЦР при выявлении гепатита С

Анализ ПЦР на гепатит С представляет собой внутривенный забор крови с целью определения в ней вируса РНК гепатита на генетическом уровне. Своё название анализ получил исходя из метода исследования.

ПЦР — это полимеразная цепная реакция, с помощью которой в сыворотке крови определяют наличие гепатита С. Итог может быть положительным и отрицательным.

Достоинства метода ПЦР

Этот метод диагностики обладает следующими достоинствами:

1. Метод ПЦР позволяет определить следующие результаты:
   • наличие вируса РНК;
   • степень радиоактивного излучения;
   • первоначальную генетическую информацию;
   • уникальность и неповторимость генетических данных.
2. Можно использовать любой необходимый клинический материал:
   • кровь;
   • плазма;
   • моча;
   • биологические жидкости и выделения;
   • мокрота и другие.
3. Позволяет определить в крови более одного микроорганизма одномоментно, в отличие от других проб.
4. Получение результата в течение суток.
5. Упрощённые методы хранения и транспортировки анализа, возбудители определяются даже в мёртвой среде.
6. Уникальность ПЦР позволяет выявлять определённые микроорганизмы, которые не поддаются ни одной другой пробе.
7. Высокая степень чувствительности реактивов, тест является самым точным в своём роде.

Особенности качественного анализа ПЦР

Качественный тест проводится с целью определения наличия вируса в крови и получения отрицательного или положительного итога.

Показанием к проведению этого вида диагностики является выявление в организме пациента антител к гепатиту С.

Возможные итоги:

• обнаружено (положительный);
• не обнаружено (отрицательный).

Качественный тест не подходит пациентам с очень низким содержанием вируса в крови, так имеет определённую чувствительность.

Результат «обнаружено»

Обнаружить вирус гепатита С можно уже через несколько недель после инфицирования организма, даже при отсутствии антител к этому возбудителю. Такой результат свидетельствует о наличии в организме и кровипациента фрагмента РНК, характерного для гепатита С.

Пациент считается инфицированным данным вирусом и подвергается дальнейшему распространению патогенных клеток в организме.

Результат «не обнаружено»

Такой вариант говорит о том, что в исследуемом образце биологического материала отсутствуют фрагментыРНК специфичные для гепатита С. Это отрицательный результат.

Чувствительность теста не позволяет выявить низкое содержание фрагментов РНК, поэтому итог «не обнаружено» не всегда является правдоподобным.

Особенности интерпретации результатов

Главной особенностью интерпретации результатов является порог чувствительности метода ПЦР.

Он зависит от следующих показателей:

• точность проведения исследования;
• вид и качество используемой аппаратуры.

Отмечено, что чувствительность может колебаться в пределах 10-500 МЕ/мл. Из этого следует, что если в организме исследуемого пациента присутствует вирус в концентрации меньше 10 МЕ/мл тест покажетрезультат «не обнаружено». Но это вовсе не означает, что возбудитель полностью отсутствует.

Варианты диагностических систем

На данный момент выделяют следующие варианты систем диагностики:

1. Если забор крови проводится у пациента, находящегося на противовирусном лечении, то должны быть использованы системы диагностики чувствительностью не меньше 50 МЕ/мл. Для этой цели применяют следующие анализаторы:
   • Cobas Ampicolor ВГС-Теst;
   • РеалБест РНК ВГС.
2. Чтобы поставить окончательный диагноз «гепатит С» необходимо обнаружить РНК вирус в трёх разных заборах биологического материала. Эти рекомендации разработаны Всемирной Организацией Здравоохранения. Эсли итог трехкратно отрицательный, то диагноз не подтверждается.
3. На данный момент помимо метода ПЦР существует более точный тест, именуемый ТМА (транскрипционный метод амплификации). Его порог чувствительности гораздо выше, чем в других методикахдиагностики.

Диапазон выявляемых модификаций вирусов

На данном этапе развитии генетики известно несколько видов и вариантов модификации вирусов.

Лабораторная диагностика в нашей стране со стопроцентной точностью может определить следующие генотипы:

• 1а;
• 1в;
• 2а;
• 2в;
• 2с;
• 3;
• 4;
• 5а;
• 6.

Особенности количественного анализа ПЦР

Количественный анализ представляет собой определение вируса гепатита С в организме человека. Во время исследования с помощью ПЦР определяют РНК и вирусную нагрузку в исходном материале. Иначе, можно сказать, что тест позволяет выявить какое количество вирусных клеток находится в биологической жидкости. Для этого вида исследования используется только венозная кровь. Специфической подготовки к тесту нет.

Количественный анализ позволяет вести контроль на уже начавшемся этапе лечения и оценивать его эффективность. Для оценки берут данные теста до начала и во время терапевтических мероприятий. С помощью полученных результатов можно прогнозировать течение болезни.

При успешности выбранного метода лечения через 3 месяца количество РНК должно уменьшиться в несколько раз. Согласно рекомендациям количественный анализ проводят через один, затем через три и шесть месяцев. Последний результат при успешности лечения должен быть отрицательным.

Оценка результатов количественного теста ПЦР

В нашей стране существует 2 возможных варианта оценки результата количественного теста ПЦР:

• количество копий на миллилитр биологической жидкости;
• количество международных единиц на миллилитр.

Чтобы получить международные единицы количество копий делят на 4.

Выделяют 2 уровня нагрузки или виремии:

• высокая с показателем ПЦР выше 800000 МЕ/мл;
• низкая с показателем ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

Результат количественного теста предусматривает 2 варианта:

• «ниже диапазона измерений»;
• «не обнаружено» (отрицательный).

Оценка: «ниже диапазона измерений»

Такое заключение ставится когда количественный тест РНК не обнаружил в исходном материале клетки возбудителя гепатита С. Но вирус всё равно присутствует в крови. Достоверность анализа подтверждаетсякачественным способом, так как порог чувствительности количественного теста может не обнаружить маленькие значения и концентрации возбудителя.

Оценка: «не обнаружено»

Такое заключение ставиться когда в исходном материале во время диагностики не были обнаружены РНКвирусы гепатита С. Это отрицательный результат.

Интерпретация результатов анализа количественного теста ПЦР

С помощью показателя вирусной нагрузки определяют:

• степень запущенности болезни;
• насколько заразен больной;
• эффективность противовирусной терапии.

Чем выше показатели вируса гепатита С в организме, тем опаснее пациент для окружающих людей и тем прогрессивнее его заболевание.

ПЦР на гепатит С является важным методом диагностики, особенно в процессе терапевтических мероприятий. Благодаря полученным отрицательным или положительным итогам можно оценить их эффективность, полностью излечить больного или сократить сроки лечения.

Полезное видео о полимеразной цепной реакции

Частые вопросы

Как работает метод ПЦР при выявлении гепатита С?

Метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) используется для обнаружения генетического материала вируса гепатита C в крови. Он позволяет увеличить количество вирусной РНК до уровня, достаточного для обнаружения, и определения генетического варианта вируса.

Какова точность метода ПЦР при выявлении гепатита С?

Метод ПЦР имеет высокую точность и чувствительность при выявлении гепатита C. Он способен обнаруживать вирусную РНК даже при очень низкой концентрации вируса в крови, что делает его одним из наиболее надежных методов диагностики этого заболевания.

Какие преимущества имеет метод ПЦР перед другими методами диагностики гепатита C?

Метод ПЦР обладает высокой специфичностью и чувствительностью, что позволяет обнаруживать вирус гепатита C на ранних стадиях инфекции, когда другие методы диагностики могут быть менее эффективны. Кроме того, этот метод позволяет определить генетический вариант вируса, что важно для выбора оптимального лечения.

Полезные советы

СОВЕТ №1

При подготовке к методу ПЦР для выявления гепатита C следует соблюдать все рекомендации врача, включая правила подготовки к анализу, такие как натощак сдать кровь, исключение приема пищи за 8-12 часов до анализа.

СОВЕТ №2

Важно выбрать аккредитованную лабораторию для проведения анализа методом ПЦР на гепатит C, чтобы быть уверенным в качестве и достоверности результатов.